Molekulare Testsysteme

(Modulnummer MT.2.215)

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Impressum     Intern

Verwendbarkeit des Modules

• Master Pharma-Biotechnologie (Pflichtmodul) im 3. Semester

Inhalt

Allgemeine Lehrziele:

Molekulare Grundlagen und Konstruktion von Bioinstrumenten für das Auffinden von molekularen Wirkstoff-Targets und das Target-orientierte Screening von Wirkstoffen sowie für die Forschung, Diagnostik und Therapie von Erkrankungen des Menschen.

Inhalt der Vorlesung:

• Suchstrategien für molekulare Targets mit Reporter-Genen; Konstruktion Target-orientierter Testsysteme; Screening von Genbanken; Transkriptionsassays zur Bestimmung von Protein-DNA- und Protein-Protein-Interaktionen (Ein-, Zwei- und Multihybridsysteme; Mating-Technologie; Signal-weg- Assays)
• Tandem Affinity Purification (TAP) zur Isolierung von Proteinkomplexen
• Rekombinante Antikörper-Techniken (Formate, Generierung, Vektoren zur Klonierung und Selektion von Antikörpern):
  • Antikörperbibliotheken, “Phage display”, “Panning”
  • “Selective Infective Phagen-Technology” (SIP) Ribosomen-Display
  • “Peptid On Plasmid”-Technologie, Attenuierte Impfstoffe (“subunit vaccines”)
  • Antikörper (AK) -Design: Maus-AK, AK-Chimäre
• Bispezifische AK in der Tumortherapie und AK-Fusionsproteine
• Microarray-Technologie (DNA-, RNA- und Protein-Arrays)
• Diagnostik von Erbkrankheiten des Menschen auf der Grundlage von PCR und RFLP

Praktikum:

Klonierung und Expression pharmabiotechnologisch relevanter Gene mittels ortsspezifischer Rekombination (Gateway^TM Technologie)

Methoden:

• PCR
• Klonierung durch Rekombination (“one tube method“)
• Transformation von Bakterien und Hefen
• Proteinexpression
• Proteinauftrennung im PAA Gel
• Plasmidreinigung
• Induktion der Proteinexpression
• “Plasmid rescue“ aus Hefen
• Affinitätschromatographie
• Western-Blot-Analyse
• Sequenzierung

Qualifikationsziele

Vermittlung darüber, was über die Fermentationstechnik hinaus, gegenwärtig unter dem Begriff Pharma-Biotechnologie zu verstehen ist. Der biologische Teil zur Definition des Begriffs „Bioinstrumente“ wird an konkreten Beispielen sichtbar gemacht.

Lehr- und Lernformen

Praktikum: Experimente im Genlabor.

Voraussetzungen/Vorkenntnisse

Kenntnisse aus den Grundlagen der Gentechnik.

Voraussetzungen für die Vergabe von ECTS Credits

Schriftliche Prüfungsleistung (90 min.), Laborschein

Arbeitsaufwand (workload)

Lehrmaterialien

Vorlesungsskript und Versuchsanleitungen zum Praktikum als PDF-Datei im Intranet

Literaturangaben

• Knippers, R., Nordheim, A.: Molekulare Genetik, Thieme, Stuttgart [u.a.], 2001.
• Originalpublikationen.

Alle Angaben auf dieser Website sind ohne Gewähr. Rechtsverbindlich sind ausschließlich die Prüfungs- und Studienordnungen im jeweiligen Verkündungsblatt.